Warning: Declaration of WPRandomPostsWidget::update($new_instance) should be compatible with WP_Widget::update($new_instance, $old_instance) in /home/hydra16/ftp/wojskogedeona.pl/wp-content/plugins/wp-random-posts/randomposts.php on line 38
Mutacja w ludzkim genie MPDU1 powoduje wrodzone zaburzenie typu glikozylacji If (CDG-If) ad 5 – Wojskowy szpital Gedeona

Wojskowy szpital Gedeona

Mutacja w ludzkim genie MPDU1 powoduje wrodzone zaburzenie typu glikozylacji If (CDG-If) ad 5

8 września 2019 by admin

Pozycje Man5GlcNAc2, Man9GlcNAc2, Glc1Man9GlcNAc2 i Glc3Man9GlcNAc2 są wskazane jako M5, M9, G1 i G3. * Glc1Man5 lub Man6. Białkowe oligosacharydy (PDO) analizowano z tych samych eksperymentów. PDO zostały uwolnione przez PNGazę F z końcowych granulek po ekstrakcji chloroformem / metanolem. Ze względu na kotranslacyjne działanie glukozydazy, głównymi oligosacharydami uwalnianymi z białek komórek kontrolnych są G1Man9GlcNAc2 i Man9GlcNAc2 (Figura 3). U pacjenta są to również najliczniej występujące oligosacharydy, ale stwierdza się, że znacznie więcej skróconych postaci migruje zgodnie z oczekiwaniami dla Man5y7GlcNAc2. Jest możliwe, że te skrócone oligosacharydy mogą być glukozylowane, jak widać w komórkach CHO Lec35. Zakładając podobną kinetykę przetwarzania węglowodanów, ten wynik prawdopodobnie będzie spowodowany zwiększonym transferem skróconych oligosacharydów do komórek pacjenta, zjawisko opisane również w komórkach CHO Lec35 (2). Ponieważ uszkodzone etapy wydłużania LLO są również wadliwe w komórkach CHO Lec35, badano ludzki homolog Lec35. Sekwencjonowanie ludzkiego genu MPDU1 / Lec35. Region kodujący ludzki gen MPDU1 zsekwencjonowano z cDNA pacjenta i kontrolnych fibroblastów. Pacjent miał homozygotyczną mutację punktową 221T3C (74Leu Ser), która została potwierdzona na poziomie genomowym. Wielokrotne dopasowanie sekwencji kodujących Lec35 z różnych gatunków potwierdziło, że alifatyczne łańcuchy boczne są konserwowane w pozycji zmienionej reszty aminokwasowej (Figura 4). Mutacja wygenerowała nowe miejsce restrykcyjne TaqI. Analiza restrykcyjna eksonu 3 wykazała mutację u pacjenta, a także status heterozygotyczny jego rodziców (Figura 5). Pięćdziesiąt zdrowych europejskich dawców miało prawidłową sekwencję na obu allelach, wyłączając tę zmianę jako wspólny polimorfizm w ludzkim genie MPDU1 (nie pokazano). Figura 4 Wielokrotne dopasowanie sekwencji białka Lec35 i homologów z różnych gatunków. Regiony zachowane we wszystkich gatunkach pokazane są w czarnych skrzynkach. Szare pudełka wskazują identyczne aminokwasy w białkach ludzkich, mysich i chomiczych. Czerwone pole identyfikuje zmutowany aminokwas. Produkt genowy F38E1.9 (Caenorhabditis elegans, numer dostępu AAA83473); Produkt genowy CG3792 (Drosophila melanogaster, AAF52190.2); Białko Lec35 (Cricetulus griseus, AAG01096); Supl15h (Mus musculus, BAA78781.1) i defekt utylizacji mannozy-P-dolicholu (Homo sapiens, XP_008236.1). Figura 5 Analiza restrykcyjna TaqI eksonu 3. Mutacja 221T . C generuje miejsce restrykcyjne TaqI. Oba zmutowane allele pacjenta są cięte za pomocą TaqI (P). Jeden wycięty i jeden niecięty allel pokazuje heterozygotyczny stan rodziców (F, M). Kontrolne DNA pozostaje nieprzycięte (C). M, marker; P, pacjent; F, ojciec; M, matka; C, kontrola. Ekspresja ludzkiego MPDU1 / Lec35 w mutantach CHO Lec35. CDNA z kontroli i pacjenta sklonowano w wektorze ekspresyjnym pTre2hyg, jak opisano i wyrażono w komórkach T35-off Lec35.1 w nieobecności tetracykliny. LLO znakowano w stabilnych transfektantach przez 30 minut z [2-3H] -mannozą i goniono przez 10 minut, aby umożliwić zakończenie biosyntezy. Oligosacharydy uwolniono z ekstrahowanych LLO i analizowano metodą HPLC. Lec35.1 Komórki Tet-off transfekowane wektorem bez insertu wykazywały oczekiwany fenotyp z obciętym oligosacharydem, który został potwierdzony jako Man5GlcNAc2 przez równoległy wzorzec fluorescencyjny (Figura 6a, wektor). Rodzicielskie komórki CHO typu dzikiego miały większość znacznika w pełnej długości oligosacharydzie Glc3Man9GlcNAc2 (Figura 6d, rodzicielski CHO). Komórki CHO Lec35.1 wyrażające ludzki homolog z ich wadliwym genem wykazywały znaczną korektę fenotypu: Man5GlcNAc2 został prawie wyeliminowany, a GlcO3Man9GlcNAc2 były dominującymi oligosacharydami (Figura 6b, kontrolny cDNA). Ta prawie całkowita korekcja mannozylacji i częściowej korekcji glukozylacji była porównywalna z korektą, która wystąpiła, gdy cDNA chomika Lec35 ulegał ekspresji w tych komórkach. Przeciwnie, gdy ulegał ekspresji zmutowany cDNA pacjenta, obserwowano podobny fenotyp LLO, jak stwierdzono w fibroblastach pacjenta (Figura 6c, cDNA pacjenta). Poziomy mRNA ludzkiej wiadomości MPDU1 w obu liniach komórkowych analizowano metodą PCR w czasie rzeczywistym, stosując aktynę jako wewnętrzny standard i były one porównywalne w obu liniach komórkowych (nie pokazano). Figura 6LLO profilu stabilnych transfektantów i kontroli CHO MPDU1 / Lec35. Komórki Lec35.1 pTet-Off transfekowano pustym wektorem (a), normalnym allelem Lec35 (b) lub allelu MPDU1 pacjenta (c). (d) Wyniki dla rodzicielskich komórek CHO typu dzikiego
[przypisy: atrakcje turystyczne karpacz, ból przy oddawaniu stolca, o czym rozmawiać z dziewczyną na pierwszym spotkaniu ]
[patrz też: migotanie przedsionków przyczyny, malowanie włosów w ciąży, wojsko gedeona ]

Posted in: Bez kategorii Tagged: malowanie włosów w ciąży, migotanie przedsionków przyczyny, wojsko gedeona

Partnerzy serwisu:



Zobacz tez:

Wazoaktywny peptyd jelitowy jako nowy lek do leczenia pierwotnego nadciśnienia płucnego ad 6

Dowodzą tego następujące wyniki: scyntygrafia receptorów 123I-VIP narządów ludzkich wykazuje stosunkowo dużą gęstość w miejscach wiązania VIP w tkance płucnej. Podczas gdy nie udało nam się wykryć VIP w surowicy i tkance pacjentów PPH, receptory uległy zwiększeniu. Podstawienie przez VIP powoduje znaczną poprawę hemodynamiki płucnej w PPH. VIP pełni funkcję silnego środka rozszerzającego naczynia krwionośne ... [Read more...]

Przepływ pochwy HIV-1 związanego z komórkami u myszy jest blokowany przez miejscowy środek modyfikujący membranę cd

Skrawki tkanki wybarwiono kontrastowo DAPI, a następnie zbadano i sfotografowano za pomocą mikroskopii epifluorescencyjnej. Toksyczność nabłonka pochwy. Myszy CF-1 traktowano wstępnie 2,5 mg progestyny; tydzień później, trzy grupy po trzy myszy zaszczepiono 50 ul PBS, 1% (wag./obj.) Nonoksynol-9 lub 3% (wag./obj.) A-CD (~ 20 mM, Cyclodextrin Technologies Development Inc., Gainesville, Floryda, USA). Każdy testowy roztwór ... [Read more...]

Mutacja w ludzkim genie MPDU1 powoduje wrodzone zaburzenie typu glikozylacji If (CDG-If)

Opisujemy nowe wrodzone zaburzenie glikozylacji, CDG-If. Pacjent ma poważne opóźnienie psychoruchowe, drgawki, niezdolność do rozwoju, suchość skóry i łuszczenie się za pomocą erytrodermii i zaburzenia widzenia. CDG-If jest spowodowane defektem genu MPDU1, ludzkiego homologa chomika Lec35, i jest pierwszym zaburzeniem, które wpływa raczej na zastosowanie, niż na biosyntezę, substratów dawcy dla oligosacharydów związanych z lipidami. ... [Read more...]

DevURL

Polecane:

pościel
mediportal.pl

Tags

atrakcje turystyczne karpacz badanie progesteronu cena ból przy oddawaniu stolca chirurg naczyniowy rzeszów duszniki zdrój uzdrowisko instytut hematologii chocimska koper włoski właściwości lecznicze malowanie włosów w ciąży maska aloesowa natur vital migotanie przedsionków przyczyny objawy niewydolności nerek real rybnik godziny otwarcia rewaskularyzacja syn boży cda szczoteczka elektryczna dla dzieci od kiedy terapia skoncentrowana na rozwiązaniach termometr microlife instrukcja vitamed aleksandrów łódzki wojsko gedeona wyposażenie apteczki domowej zapalenie zatoki klinowej objawy zespół bocznego przyparcia rzepki

Copyright © 2021 Wojskowy szpital Gedeona.